速率法测肌酐优缺点 干化学速率法检测肌酐在临床的应用分析
时间：2019-01-14 04:37:58 来源：达达文档网 本文已影响 人 
[摘要]目的：通过干化学速率法与苦味酸速率法检测血肌酐相比较，进一步探讨其精密度、抗干扰及防污染能力。方法：通过不精密度试验、50例对比试验、干扰试验进行检测。结果：千化学速率法批内、批间，标准差、CV％值均小于苦味酸速率法。对比试验：干化学速率法与苦味酸速率法相关系数r=0.964 6，P>0.05。干扰试验：干化学速率法基本无干扰。苦味酸速率法维生素227 zgL以上有正干扰。胆红素43~mol／L以上有负干扰。结论：干化学速率法不但精密度高，而且抗干扰能力强。与苦味酸速率法有良好的一致性。加标本采用一次性吸头，无需反应杯，又防止了标本间的交叉污染。因此，对临床的使用价值很高。
[关键词]速率法；苦味酸；干化学；肌酐
[中图分类号]R115 [文献标识码]B [文章编号]1674-4721(2010)01(b)-072-01
临床实验室肌酐测定的方法从最早的Jaffe肌酐分析法，又发展为同一原理的速率法。笔者通过对苦味酸速率法和干化学速率法在不同仪器上检测肌酐做了对比分析。
1 资料与方法
1.1 试剂
上海长征康仁医学科学有限公司生产的苦味酸速率法试剂盒和美国强生公司生产的干化学试剂子弹夹。标准品是两厂家配备的。仪器：日本olympus-AU640型全自动生化分析仪和美国强生VITROS 5.1全自动干式生化分析仪。
1.2 干化学速率法
反应温度37℃，工作环境温度10～30℃。湿度20％～80％。工作电源220 V,50 Hz，通过光的透射与反射来测量。待测标本加到试剂干片上，反应3-5 min即出结果。样本浓度可通过Kubelka-Munk理论来计算。苦味酸速率法：波长520 nm，温度37℃，样品：试剂为20：200。反应时间为54～126 s，读取吸光度的变化。
2 结果
2.1 不精密度试验
用混合血清同时使用两种方法。干化学速率法：批内20例，批间10例；均值分别为85.2、87.2 umol/L；标准差分别为1.65、2.04；CV分别为1.94％、2.34％。苦味酸速率法：批内20例、批间10例；均值82.6、86.9 l~mol／L；标准差分别为3.52、4.56；CV分别为4.26％、5.24％。
2.2 对比试验
取50份标本分别在OLYMPUS-AU640自动生化分析仪用苦味酸速率法和VI丁ROS 5，1自动生化分析仪上用干化学速率法测定血清肌酐，并作比较。干化学速率法均值87，28 I，~mol／L，标准差8，42，CV％9，65。苦味酸速率法均值86，58}*mol／L，标准差9，81，CV％11，33。相关系数r=0，964 6，P>0.05。
2.3 干扰试验
在混合血清]m1中加入一定量的脂类(三酰甘油)、葡萄糖、胆红素、维生素C等干扰物，进行肌酐测定。结果表明：上述干扰物均对于化学速率法无干扰。而三酰甘油4，0 mmol／L以上、维生素C 227 g／L以上对苦味酸速率法有正干扰，胆红素43 txmo]／L以上有负干扰。
3 讨论
上述各项指标说明，干化学速率法是测定血清肌酐方法学的又一大进步，精密度高，批内、批间CV值是其它肌酐测定法不能达到的。并与苦味酸速率法有良好的一致性，尸，0.05，特别是抗干扰物强于苦味酸速率法。因它的试剂基本结构是由多层膜组成，其中辅助试剂层，主要是用来去除血清内源性干扰物，最常见的是在辅助层固定有维生素C酶，以消除血清中维生素C对过氧化氢的还原作用，另外，在该层还可以运用免疫沉淀、亲和过滤、凝胶过滤及渗析等方法，选择性地把待测物和干扰物分开，从而使测定结果更加准确。如胰淀粉酶干片，辅助层含有抗唾液淀粉酶的单克隆抗体，使样品中的唾液淀粉酶与之结合留在辅助层中，而只有胰淀粉酶转运至反应层，这样对结果的准确、误差更小起到一个重要的保证。虽然苦味酸速率法比起终点法是一大进步，但在苦味酸－肌酐复合物形成开始之前，有10-60 s的延迟，这就使快反应干扰物，如：乙酰乙酸，在开始测定前引起吸光度变化的千扰被排除。测定时间是在16-120 s完成，这样肌酐和慢反应干扰物尚未发生明显反应之前测定便已结束C4I，使特异性有很大的提高，但仍然受到干扰物的干扰，尤其是胆红素对肌酐测定的负干扰。胆红素被氧化为胆绿素，在520 rim处光吸收很弱。掩盖了肌酐本身的显色反应表现，使得结果偏低。在对比试验中苦味酸速率法稍低于干化学速率法。另外，苦味酸色素对比色杯的污染是长期使用全自动生化分析仪的一个主要问题。清洗液效力低，温度不够，就不能有效地去除肌酐于碱性苦味酸化合物的污染，而干化学速率法不存在此问题，无需水源和污水排放系统，无需反应杯，每份标本一个吸头，有效防止了标本间的交叉污染p)。因此，对临床具有很高的使用价值。
